KOBAYLARDA APOLİPOPROTEİN B VE PARKİNSON HASTALIĞI İLE İLİŞKİLİ GENLER ARASINDAKİ KORELASYONUN ARAŞTIRILMASI

Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, BAP Doktora, 2022 - 2024

Proje Türü: Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje
Destek Programı: BAP Doktora
Başlama Tarihi: Temmuz 2022
Bitiş Tarihi: Mayıs 2024

Proje Özeti

Parkinson hastalığı, substantia nigra bölgesinde bulunan dopaminerjik nöronların kaybı ile karakterize olan ilerleyici nörodejeneratif bir bozukluktur. Apolipoprotein B-100(Apo B-100) kolesterolün taşınmasında görev alan bir proteindir. Literatürde lipid metabolizması ve Parkinson hastalığı arasındaki bağlantının incelendiği çalışma sayısı hem az hem de elde edilmiş veriler açısından yetersiz ve tutarsızdır. Bu nedenle çalışmamızda Parkinson hastalığında önemli bir rolü bulunan PINK1, PARKIN ve SNCA proteinleri ile lipid metabolizmasında yer alan Apo B-100 proteini arasındaki olası korelasyonun araştırılması amaçlanmaktadır. Çalışmamızda lipid metabolizması için model olarak uygun olan kobaylar kullanılacaktır. 24 adet kobay (8-10 haftalık Hartley albino Guinea pig (Cavia porcellus)) bir grupta 6 dişi, 6 erkek olmak üzere 12 adet kobay olacak şekilde rastgele 2 gruba ayrılacaktır: Grup-1(Kontrol Grubu) ve Grup-2(Deney Grubu). 12 hafta boyunca kontrol grubundaki kobaylara standart chow diyet ve su, deney grubundaki kobaylara kolesterol içeren yüksek yağlı diyet ve su ad libitum olarak verilecektir. 12 hafta sonunda feda edilecek kobaylardan anestezi altında kardiyak punktur yöntemiyle elde edilen kan örnekleri serum tüplerinde toplanacaktır. Elde edilen beyin ve beyincik dokuları ise sagittal düzlemde tam ortadan olacak şekilde 2’ye bölündükten sonra bir yarıları RT-PCR ve ELISA için diseke edilip sıvı nitrojende dondurulacak, diğer yarıları ise histokimyasal ve immünohistokimyasal analizler için fiksatif içine alınacaktır. Çalışmanın amacı doğrultusunda verilerin elde edilebilmesi için PARK2(PARKIN), PARK6(PINK1) ve SNCA genlerinin ekspresyonları ile Apo B-100 reseptörü olan LDLR geninin ekspresyonu RT-PCR yöntemi ile analiz edilecektir. Beyin ve beyincik dokularında PARK2(PARKIN), PARK6(PINK1), SNCA, LDLR, fosfo-PARKIN, fosfo-PINK1, fosfo-SNCA ve tirozin hidroksilaz protein yoğunluklarının belirlenebilmesi için immünohistokimyasal işaretleme yapılacaktır. Apo B-100 miktarı serumda, beyin ve beyincik dokularında ELISA ile kantitatif olarak belirlenecektir. Serum kolesterol miktarı da ticari kit kullanılarak ölçülecektir. Verilerin istatistiksel analizi SigmaStat 3.5 (Systat Software, Inc., ABD) programıyla yapılacaktır.